动物模型名称:FSH联合HCG致超排怀孕小鼠模型2、实验动物种属:KM小鼠或NIH小鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:3~4周龄5、实验动物体重:16~18g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:注射用重组人促卵泡***(FSH)联合注射绒促性素(HCG)诱导。对雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG当天下午约16:00~17:00按雌雄鼠1:1合笼。次日早上检查雌鼠阴栓情况。2、检测标准:合笼后次日雌鼠检查出现阴栓,表明成功构建了超排怀孕小鼠模型。哪里可以做动物模型?杨浦区疾病动物模型建模评价
ng)=×片段碱基对数(单片段);适片段用量(ng)=×片段碱基对数(多片段)。注1:单片段重组反应,若单个插入片段的长度大于载体,则应将载体与插入片段的计算公式互换;注2:单片段重组反应,若单个插入片段的长度小于200bp,则插入片段应使用5倍的用量;注3:多片段重组反应,各个插入片段的用量应不少于10ng,使用上述公式计算适使用量低于此值时,直接使用10ng;注4:若按上述公式计算出的线性化载体用量低于50ng或高于200ng,建议按50ng或200ng用量使用;注5:线性化载体过长,插入片段过长或片段数过多,克隆阳性率均会降低。2、体系反应;1、配制完成后,用移液器轻轻吸打混匀各组分,避免产生气泡,切勿涡旋;2、将反应体系置于50℃,反应5~60min。3、将反应液离心管置于冰上冷却,之后进行转化或者储存于-20℃注1:推荐使用PCR仪等温控的仪器进行反应,反应时间不足或太长克隆效率均会降低;注2:插入1~2个片段时,推荐反应时间为5~1min;插入3~5个片段时,推荐反应时间为15~30min;注3:当载体骨架在10kb以上或插入片段总长在4kb以上时,推荐延长反应时间至30~60min;注4:建议在50℃反应完成后进行瞬时离心,将反应液收集至管底。注5:-20℃储存的重组产物。普陀区疾病动物模型建模公司收集研究疾病的生物学信息资料。
2mg组、4mg组、6mg组lh水平均上升,同样,只有2mg组有明显升高(p<),如图3所示。表3表4②体重变化:(mean±sd),如图4所示:2mg组(连续注射7天)与空白组相比,大鼠体重***下降(p<,注射第2天开始)。3mg组(连续注射7天)与空白组相比,大鼠体重***下降(p<,注射第4天开始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg组(第1、8天注射)与空白组相比,大鼠体重分别在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg组体重在停止给药后4天与空白组无差异。③卵巢重量:如表5、图5所示,2mg、6mg组大鼠在经过顺铂注射后卵巢重量相比对照组,都有不同程度缩减,其中2mg组卵巢重量明显减轻(p<),4mg、6mg组无明显差异。表5④动情周期观察(阴道涂片):3mg组动物死亡时间早,无完整的动情周期。如表、图6所示。正常大鼠动情周期4-5天。分为四个阶段,动情前期:撇圆形有核上皮细胞占绝大多数,白细胞和角化上皮细胞很少(图a)。动情期:角化上皮细胞占多大多数,由散在增至集白细胞和有核上皮细胞很少(图b)。动情后期:片状角化上皮细胞,有核上皮细胞和白细胞3种都有,无太大差异(图c)。动情间期:白细胞占绝大多数,有核上皮细胞和角化上皮细胞很少(图d)。表6⑤病理结果:如图7所示。
因此,应用动物模型,除了能克服在人类研究中经常会遇到的理论和社会限制外,还容许采用某些不能应用于人类的方法学途径,甚至为了研究需要可以损伤动物组织、或处死动物。(二)临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来临床上平时很难收集到放射病、毒气中毒、烈性传染病等病人,而实验室可以根据研究目的要求随时采用实验性诱发的方法在动物身上复制出来。(三)可以克服人类某些疾病潜伏期长,病程长和发病率低的缺点一般遗传性、免疫性、代谢性和内分泌等疾病在临床上发病率很低,例如急性白血病的发病率较降,研究人员可以有意识地提高其在动物种群的中发生频率,从而推进研究。同样的途径已成功地应用于其他疾病的研究,如血友病、周期性中性白细胞减少症和自身免疫介导性疾病等。动物疾病模型的另一个富有成效的用途。
目前鉴定出15个外显子,外显子1起始密码为atg,外显子15的终止密码子是tga(转录本:)。pirb蛋白属于i型跨膜糖蛋白,包含由六个免疫球蛋白样结构域(domain,d)组成(d1-d6)的胞外段,一个疏水的跨膜段,三个免疫受体酪氨酸依赖的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一个itims样序列组成的胞内段。理论上讲,pirb的分子量约为92kd,但是western-blot分析中,pirb经常位于105kd处,因为pirb是糖蛋白。以往研究发现,pirb在免疫系统和中枢调节中均发挥重要作用。在免疫系统中,pirb在许多造血细胞都有表达,包括b细胞、肥大细胞、巨噬细胞、粒细胞和树突细胞,但是在胸腺细胞、成熟的t细胞和自然杀伤细胞不表达。能够准确模拟人相关特定功能与疾病特征。杨浦区疾病动物模型建模评价
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呼吸系统疾病动物模型(animalmodelofrespiratorydiseases)1、肺炎动物模型:通过在主支气管注入活菌液。2、肺气肿模型:给动物气管内或静脉内注入一定量木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、致热溶解酶、败血酶以及由脓性痰和白细胞分离出来的蛋白酶等,可复制成实验性肺气肿。以木瓜蛋白酶形成的实验性肺气肿病变明显而且典型。3、肺水肿模型:用氧化氮吸入可造成大鼠和小鼠中毒性肺水肿,或用气管内注入50%葡萄糖液引起渗透性肺水肿。4、肺纤维化模型:气管内注入博来霉素是目前常用复制肺纤维化动物模型方法。杨浦区疾病动物模型建模评价
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